Ауыл шаруашылық ғылымдары Агрономия ауыл шаруашылық Ғылымдары



жүктеу 7.26 Mb.
бет30/51
Дата17.06.2016
өлшемі7.26 Mb.
1   ...   26   27   28   29   30   31   32   33   ...   51

ЛИТЕРАТУРА
1. Авилов, В. М. Актуальные проблемы профилактики особо опасных инфекций у животных / В. М. Авилов, В. А. Седов. // Ветеринария. – 1994. – № 6. – С. 3.
2. Потапов, Н. М. Иммунопрофилактика бруцеллеза крупного рогатого скота в Приморском крае / Н. М. Потапов // Научно-техн. бюлл. ИЭВ Сибири и Дальнего Востока. – 1982. – №10. – С. 12.
3. Салмаков, К. М. Специфическая профилактика бруцеллеза крупного рогатого скота / К. М. Салмаков, Г. А. Белозерова, А. М. Фомин // Материалы научно-произв. конф. по проблемам ветеринарии и животноводства. – Казань. – 1995. – С. 10-11.
4. Тихонов, И. В. Биотехнология / И. В. Тихонов, Е. А. Рубан, Т. Н. Грязнева и др. – Под ред. Акад. РАСХН Е. С. Воронина. – СПб.: ГИОРД. – 2005. – 192 с.
5. Шевелуха, В. С. Сельскохозяйственная биотехнология / В. С. Шевелуха, Е. А. Калашникова, Е. С. Воронин и др. – 2 изд., перераб. и доп. – М. : Высшая школа. – 2003. – 222 с.
УДК: 616. 995. 122: 619
экспериментальное получение марит гельминтов OPISTHORCHIS FELINEUS
Л. А. Лидер, кандидат вет. наук, М. А. Куйбагаров, кандидат вет. наук,

С. Н. Боровиков кандидат биол. наук, доцент, Ш. Серикова, соискатель
Казахский агротехнический университет имени С. Сейфуллина
Описторхтар мариталарын алу үшін зертханалық модель ретінде қолданылған қояндар теріс нәтиже көрсетті. Иттерді экспериментальды жолмен жұқтыру барысында Opisthorchis felineus түрінің 1000 нан астам трематодалары жинап алынды. Сонымен қатар аздаған мөлшерде (0,7 %) Metorchis albidus түріне жататын трематодалар да айқындалды. Аталмыш гелминттер серологиялық тесттерді әзірлеуге арналған телімді антигендерді алу үшін қолданылады.
При использовании в качестве лабораторной модели кроликов, для получения половозрелых описторхов, был получен отрицательный результат. При экспериментальном заражении собак были обнаружены более 1000 гельминтов двух видов, из них самым многочисленным оказался – Opisthorchis felineus. В меньшем количестве (0,7 %) определялись трематоды вида Metorchis albidus. Полученных гельминтов использовали для приготовления специфических антигенов, для проведения серологических тестов.
As a result of experimental infection of dogs it is received more than 1000 trematods of 2 kinds, the most numerous was Opisthorchis felineus. At use as laboratory model of rabbits for reception of trematods the negative result has been received. It is also noted the insignificant quantity of trematods of Metorchis albidus kind (0,7 %). Helmints will be used for reception of specific antigenes by working out serological tests.
Описторхоз – широко распространенное природно-очаговое паразитарное заболевание человека, вызываемое гельминтом Opisthorchis felineus, локализующимся в желчных протоках печени, желчном пузыре и поджелудочной железе. Диагностика описторхоза по клинической картине заболевания трудна из-за отсутствия симптомов и синдромов, характерных только для данной болезни [1]. Первоначально применявшиеся в серологической диагностике описторхоза реакция иммунодиффузии в геле и реакция непрямой гемагглютинации зарекомендовали себя недостаточно чувствительными, особенно при хронических стадиях заболевания [2].

В связи с этим, для совершенствования серологической диагностики описторхоза, необходимо проводить исследования по адаптации такого чувствительного метода как иммуноферментный анализ с использованием специфических антигенов.

Следует отметить, что получение половозрелых описторхов (марит) для экстракции из них сероактивных антигенов, сопряжено с определенными трудностями, обусловленными главным образом сложным циклом развития паразитов и трудностями при содержании лабораторных животных.

Целью данной работы являлось экспериментальное получение марит Opisthorchis felineus в препаративном количестве.



Материалы и методы. В опыте использовались лабораторные животные (кролики, собаки), рыба семейства карповых разных видов (язь, карась, лещ, линь, плотва). Пепсин медицинский, трипсин, соляная кислота.

Рыбу на наличие метацеркариев исследовали компрессорным методом и методом переваривания в искусственном желудочном соке.

Копрологические исследования на наличие яиц трематод проводили методами нативного мазка и Горячева.

Результаты исследования. Для получения метацеркариев описторхов было проведено исследование рыбы семейства карповых, отловленных из водоемов Акмолинской области (бассейн озера Тенгиз) и Павлодарской области (река Иртыш).

В ходе проведенных исследований получены следующие результаты (таблица 1).


Таблица 1 – Результаты исследования рыбы


Вид рыбы

Количество

исследованных особей, шт.

Количество

пораженных, шт.

Степень

пораженности, %

Интенсивность инвазии в срезе мышц, экз.

Линь

26

2

7,7

1-5

Язь

733

315

43

2-11

Лещ

55

3

5,4

1-3

Карась

12

-

0

-

Плотва

21

1

4,8

1-2

Как видно из таблицы 1, заражению личиночной стадией описторхисов в большей степени были подвержены представители вида язь, степень пораженности при этом составила 43 %. В связи с этим, для дальнейших исследований старались отбирать рыбу только этого вида.

Выделенных из тканей рыб метацеркариев переносили в каплю физиологического раствора на предметное стекло и исследовали сначала под малым, а затем под большим увеличением микроскопа для определения жизнеспособности. Подвижность и жизнеспособность личинок была удовлетворительной (рисунок 1).

Рисунок 1 – Метацеркарии описторхов
Пробы с метацеркариями объединяли, отмывали стерильным физиологическим раствором, подсчитывали количество личинок и использовали в опыте.

В результате выполнения данного этапа проекта установлена высокая степень зараженности рыбы вида язь, из мышечной ткани которых было выделено препаративное количество личиночной стадии (метацеркариев) трематод, которые были использованы для экспериментального заражения лабораторных животных.

Для заражения использовали 2 группы кроликов одинакового веса и возраста (по 3 головы в каждой группе) и 3 собак, подобранных по методу аналогов (щенки 2-месячного возраста). Предварительно, для исключения паразитоносительства проводили копрологические исследования на наличие яиц трематод.

Кроликов заражали путем принудительного спаивания им отмытых препаратов метацеркариев. Собак заражали путем вольного скармливания им рыбы (язь) пораженной личинками описторхов (по результатам компрессорного исследования).

Для контроля антителообразования у подопытных животных проводили отбор проб сывороток крови с интервалом в 7 суток. Кровь брали стерильным шприцем с иглой из краевой ушной вены кроликов и бедренной вены у собак в количестве 5-10 мл. В результате исследования проб фекалий кроликов на протяжении всего эксперимента яиц гельминтов обнаружено не было. После убоя кроликов тщательно обследовали желчный пузырь, желчевыводящие протоки и поджелудочную железу, однако результат был также отрицательным.

При тестировании проб фекалий собак у 2-х особей были обнаружены яйца гельминтов характерные для описторхов (мелкие 0,02 х 0,01мм, желтоватые с крышечкой и утолщением на одном конце) (рисунок 2) [3].



Рисунок 2 – Яйца описторхов
Для получения половозрелых гельминтов проведено гельминтологическое вскрытие позитивных по копрологическим исследованиям собак. Особое внимание уделяли печени и поджелудочной железе животных. Желчный пузырь вскрывали и промывали его оболочку физиологическим раствором. Делали соскоб со стенок желчного пузыря и наносили на предметное стекло. С помощью лупы исследовали желчь на наличие паразитов. Печень осматривали снаружи, после чего измельчали паренхиму и проводили отмывку физиологическим раствором.

В результате исследований в желчных ходах печени собак были обнаружены более 1000 гельминтов 2-х видов. Определяли видовую принадлежность обнаруженных гельминтов визуально под микроскопом.

Гельминты первой наибольшей группы размером 10×2 мм, имели ланцетовидную форму с характерным для Opisthorchis felineus строением (лопастные семенники в задней половине тела, матка занимает среднюю часть тела, брюшная присоска расположена на границе между первой и второй четвертью тела. Гельминты второй группы (общее количество – 7 шт) грушевидной формы, длина 2,5-3,5, ширина 1,2-1,6 мм, определены как трематоды вида Metorchis albidus (синоним Metorchis bilis) (рисунок 3).






1

2

Примечание:

1 – Марита Opisthorchis felineus; 2 – Марита Metorchis albidus


1   ...   26   27   28   29   30   31   32   33   ...   51


©dereksiz.org 2016
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет