Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии умкд, стоматология



бет25/63
Дата20.07.2016
өлшемі9.08 Mb.
#212160
1   ...   21   22   23   24   25   26   27   28   ...   63


Тема 13. Реакция иммунного лизиса, бактериолиз, реакция связывания комплемента. Реакция нейтрализации. Радиоиммунный, иммуноферментный анализы. Реакция иммобилизации микроорганизмов.

Цель: сформировать соответствующие компетенции по изучению современных широко применяемых для диагностики заболеваний серологических реакций (реакция иммунного лизиса, бактериолиз, реакция связывания комплемента, реакция нейтрализации, радиоиммунный, иммуноферментный анализы, реакция иммобилизации микроорганизмов.).

Задачи обучения:

-сформировать знания об основах иммунодиагностики инфекционных заболеваний;

-сформировать представление и дать характеристику о принципах и методах иммунодиагностики (реакция иммунолизиса, бактериолиз, реакция связывания комплемента, реакция нейтрализации, радиоиммунный, иммуноферментный анализы, реакция иммобилизации микроорганизмов).

-изучить механизмы, особенности и методы постановки различных иммунологических реакций;

-научить студентов интерпретировать полученные результаты

Конечные результаты обучения:

Сформировать знания о:

- методах серологической диагностики инфекционных заболеваний (реакция иммунолизиса, бактериолиз, реакция связывания комплемента, реакция нейтрализации, радиоиммунный, иммуноферментный анализы, реакция иммобилизации микроорганизмов).



Сформировать навыки по:

- постановке серологических реакций;

-интерпретации полученных результатов

Основные вопросы темы.

-рекции лизиса и бактериолизиса, ингредиенты, механизм, разновидности, способы постановки,практическое применение, достионства , недостатки

-реакции титрования комплемента и лизоцима, ингредиенты, механизм, разновидности, способы постановки,практическое применение, достионства , недостатки

-реакция связывания комплемента, механизм, системы участвующие в реакции,ингредиенты каждой системы, способы постановки,практическое применение, достионства , недостатки

-комплемент, его компоненты, участие в иммунологических реакциях, активация комплемента по классическому и альтернативному пути

-схема постановки РСК.

-реакция нейтрализации, ингредиенты, механизм, разновидности, способы постановки,практическое применение, достионства , недостатки

-реакция иммобилизации, ингредиенты, механизм, постановка,практическое применение, достоинства , недостатки



Методы обучения и преподавания (малые группы, дискуссия,сит.задачи, работа в парах,презентации, кейс-стади и т.д.)

Пассивный метод- опрос, объяснение.

Активный метод (Выполнение и обсуждение практических работ, оформление протоколов. работа с мультимедийными базами данных, компьютерными моделями и программами.)


Интерактивный (решение ситуационных задач, работа в группах, блиц-опрос, деловые и ролевые игры, мозговой штурм, критическое мышление, мини-исследования и т.п.)

Литература:

Основная:

1.Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология.- М.: МИА, 2005. - 734 с.

2.Медицинская микробиология, вирусология, иммунология (под ред. Воробьёв А.А) МИА., Москва, 2004.- 690с.

3.Коротяев А.И, Бабичев С.Л. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. - СПб.: Спец. лит, 2000. - 591 с.

4.Медицинская микробиология /Гл.ред В.И. Покровский, O.K. Поздеев. - М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 2006. — 1200 с.

5.Тец В.В. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии – М.:Медицина, 2002. - 352 с.

6.Компьютерная программа "Диаморф" - "Медицинская микробиология" - атлас-руководство по бактериологии микологии, протозоологии и вирусологии под редакцией акад.проф. Воробьева А.А.

7.Дикий И.Л, Сидарчук И.И. и др. Микробиология. Руководство к лабораторным занятием. Киев, 2004, 583 с.

Дополнительная:

1.Борисов Л.Б., Козьмин-Соколов Б.В., Фрейдлин И.С. Руководство клабораторным занятиямпо медицинской микробиологии, вирусологии, иммунологии. - М.: Медицина, 1993.

2.Н.Красилыников А II. Справочник по антисептике. - Минск. - Выс шк.- 1995. - 367с.

3.Галактионов В.Т. Иммунология. - М. - Изд. "РИЦ МДК". - 2000. – 487с.

4.Воробьев А.А. "Микробиология, иммунология". - М.: МИА, 2002.

5.Воробьев А.А., Кривошейн Ю.С., Широбоков В.П. Медицинская и санитарнаямикробиология. - М.: Издательский центр "Академия" – 2003. – 464 с.

6.Аравийский Р.А., Горшкова Г.И. Практикум по медицинской микологии. - С-Пб. - 1995. - 50 с.

7.Всант P., Мосс У., Уивер Р. Определитель нетривиальных патогенных грамотрицательных бактерий (аэробных и факультативно-анаэробных). - М.: Мир, 1999. – 791 с.

8.Внутрибольничные инфекции // Под ред. Р.П.Венцелла. - М.:Медицина, 1990.- 656 с.

9.Саттон Д., Фотергилл А., Ринальди М. Определитель патогенных и условно-патогенных грибов. - Изд. Мир, 2001. - 470 с.

10.МаянскийА.Н.Микробиология дляврачей. - Нижний Новгород: Издательство Нижегородской государственной медицинской академии, 1999. — 400 с.

11.Котова А.Л. Клиническая микробиология: Методические указания.-Алматы, 2004.- 162с.

12.Тец В.В. Справочник по клинической микробиологии – СП Стройлеспечать. – 1994.– 224 с.

13.Определитель бактерий Берджи /Под ред Д.Хоулта, Н.Крига, П.Снитаи др.// М.: Мир, 1997. - в 2 томах.

14.Вопросы общей вирусологии, под ред. Кисилева И.О. Санкт- Петербург, 2007, 375 с.

15.Поздеев О.К. Медицинская микробиология: Учеб. О.К.Поздеев; под ред. В.И.Покровского.-2-е изд.испр.-М.:ГЭОТАР-МЕД,2004.-768 с

На казахском языке:

Основная:

1. Медициналық микробиология , Алматы,2011,683 б Рамазанова Б.А, Кудайбергенұлы К.К редакциялаумен.

2. Б.А. Рамазанова, А.Л. Котова және т.б. Микроорганизмдер морфологиясы.(оқу- әдістемелік құрал) Алматы,2007, 131б.

3. Б.А. Рамазанова, К.К Құдайбергенұлы, А.Л Котова. Инфекция туралы ілім.(оқу-құралы) Алматы 2007,111 б .

4. Б.А.Рамазанова, А.Л Котова және т.б. Микроорганизмдер физиологиясы. (оқу - әдістемелік құрал). Алматы,2007, 126 б.

5. Б.А. Рамазанова, А.Л Котова және т.б. Микроорганизмдер экологиясы. (оқу- құралы). Алматы, 2007, 95 б.

6. Б.А. Рамазанова, А.Л Котова және т.б. Микробтарға қарсы қолданылатын препараттар (оқу- құралы) Алматы, 2007.,47 б.

7. Микробиология және вирусология (жалпы бөлімі): Оқу құралы /Ү.Т.Арықпаева, К.Х.Алмағамбетов, Н.М.Бисенова, Н.Б.Рахметова, Г.Д.Асемова, Койшебаева К.Б., Бисимбаева С.К., Калина Н.В./. 1-ші басылым. (Медициналық және фармацевтикалық мамандық бойынша жоғары оқу орындарының студенттеріне арналған оқу құралы) - Астана, 2005. – 208 б.

8. «Микроорганизмдердің морфологиясы» оқу құралы, Астана, 2004, 32б.; Микробиология және вирусология (жеке бөлімі): Оқу құралы /Ү.Т.Арықпаева, К.Х.Алмағамбетов, Н.М.Бисенова, Ә.Ө.Байдүйсенова, Н.Б.Рахметова, Г.Д.Асемова /1-ші басылым. (Медициналық және фармацевтикалық мамандық бойынша жоғары оқу орындарының студенттеріне арналған оқу құралы) - Астана, 2006. – 199 б.

Дополнительная:

1. Жалпы микробиологиядан лабораториялық сабақтар бойынша оқу-әдістемелік құрал (А.Л. Котованың ред.). – Алматы, 1997.

На английском языке:

Основная:

1.Richard V Georing, Hazel M Docrell, Mark Zukerman, Derek Wakelin, Ivan M Roit, Cedric Mims,Peter L Chiodini “Medical Microbiology”,4th Edithion, 2008, UK, p.656.

2.Jacquelyn G Black “Microbiology”,7 th ,WILEY,2010,p.846

3. Patric R Muray,Ken S Rosenthal, Michael F Pfaller “Medical Mcrobiology”,5th Edithion, 2008,p.962

4. Cedric Mims, Hazel M Docrell, Richard V Georing , Ivan M Roit, Derek Wakelin, Mark Zukerman, “Medical Microbiology”,3th Edithion, 2004, ELSEVIER MOSBY, p.659.

5. Geo F Brooks,Kaaren C Carroll, Janett S Butel, Stephen F Morse,24th Edithion, JAWETZ,MELNICK&ADELBERG^S

6. Mark Gladwin, Bill Trattler, “Clinical Microbiology”, 4th Edithion, MedMaster, Miami, 2007, p.393.

7. Anathanarayan R., Paniker C.K.J. Text book of microbiology. Orien Longman. Seven edition, 2005.

8. Medical microbiology. Ed.by Inta Ozols. Elsevier Mosby, 2004.

Дополнительная:

1.Robert M Diamond “Designing Assessing Courses and Curricula”, 3th Edithion,Jossey-Bass,2008,p.487

2.Patric Leonardi “Microbiology Study Guide: Key Review Questions and Answers”, Silver Educational Publishig,2005,p.78

3.N.Cary Engelberg,Victor DiRita,Terence S Dermondy, “Mechanisms of Microbial Disease” , 4th Edithion,Lippincton Williams&Wilkins,2007,p.762

4.William F Strohl, Harriet Rouse, Bruce D Fisher, “Microbiology”, Lippincton^s,2001,p.516

5.Jawetz, Melnic & Adelberg. Medical microbiology. Singapore. 2004.

6.Arora D.R. Text book of microbiology. CB. 2001.

7.William A. Stradit, Harriet Rouse, Bruce D. Fisher. Microbiology. 2001, Lippencott, Williams and Wilkins

8.Black Jacquelyn G. Microbiology. Principles & Applications, 1996 by Prentice-Hall, New Jersey

9.Medical microbiology. An introduction to Infectious Diseases. Ed. by Ryan Kenneth J. Appleton and Lange. Stamford, Connecticut, 1998.

10.Toni Hart, Paul Shears. Atlas de Roche de Microbiologie. - Paris., 1997.- 314р.



Контроль ( вопросы,тесты, задачи и пр):

Вопросы:

  1. Опишите сущность реакции лизиса и бактериолизиса,ингредиенты реакции, механизмы, методы постановки

  2. Опишите сущность реакции связывания комплемента, ингредиенты реакции, механизмы, методы постановки

  3. Опишите сущность реакции титрования комплемента и лизоцима, ингредиенты реакции, механизмы, методы постановки

  4. Опишите сущность реакции нейтрализации, ингредиенты реакции, механизмы, методы постановки.

  5. Опишите сущность реакции Кумбса, ингредиенты реакции, механизмы, методы постановки.

  6. Реакция лизиса. Сущность реакции. Виды

  7. Комплемент, его свойства, применение

  8. Реакция бактериолиза

  9. Реакция гемолиза

  10. Характеристика компонентов, участвующих в реакции иммунного лизиса

  11. Какова роль комплемента в реакциях иммунного лизиса

  12. В каких единицах измеряется сила антитоксической сыворотки?

  13. В каких единицах измеряют силу анатоксина?

  14. Что такое анатоксин?

  15. Перечислите основные условия иммуногенности естественных антигенов.

  16. Антитоксины, их применение в медицине.

Ситуационные задачи:

1. При постановке РСК, в конце 2 недели беременности, с сывороткой крови, у больной с подозрением на коклюш, реакция оказалась отрицательной. Как Вы определите визуально отрицательный результат? Объясните механизм.

2. При постановке РСК на 3 неделе болезни с сывороткой крови больного с подозрением на токсоплазмоз, она оказалась положительной. Как Вы определите визуально феномен "положительной РСК". Что означает положительное РСК в данном случае?

3.При добавлении гемолитической (индикаторной) системы к пробирке с бактериальной системой в последних произошел гемолиз. О какой реакции идет речь в данном случае? Кратко опишите механизм этой реакции. Почему в этих пробирках произошел гемолиз?


Тесты

1. РСК разработана:

а) Л. Пастером

б) Л.А. Зильбером

в) А.П. Вассерманом

г) Ж. Борде, О. Жангу

д) И.И. Мечниковым

2. Цель РСК при изучении культур микроорганизмов:

а) оценка иммунного статуса

б) серодиагностика врожденного иммунодефицита

в) сероидентификация микроорганизмов

г) серодиагностика инфекционных заболеваний

д) определение группы крови

3. Критерий отрицательной РСК:

а) полное отсутствие гемолиза

б) частичный гемолиз эритроцитов с интенсивностью +++, ++

в) полный гемолиз эритроцитов

г) образование преципитата

д) образование агглютината

4. Ингредиенты РСК при серодиагностике инфекционных заболеваний (верно все, к р о м е):

а) комплемент

б) сыворотка обследуемого

в) специфический антиген

г) гемолитическая система

д) иммунная сыворотка

5. Ингредиенты РСК при сероидентификации микроорганизмов (верно все, к р о м е):

а) комплемент

б) сыворотка обследуемого

в) исследуемая культура

г) гемолитическая система

д) иммунная сыворотка

6. Контролируемые свойства ингредиентов РСК (верно все, к р о м е):

а) осмотическая устойчивость эритроцитов

б) антикомплементарность сыворотки обследуемого

в) антикомплементарность специфического антигена

г) изотоничность физ.раствора

д) антикомплементарность гемолизина

7. Гемолизин – это:

а) сыворотка обследуемого

б) гемолизированная кровь

в) сыворотка кролика, иммунизированного эритроцитами барана

г) сыворотка крови морской свинки

д) взвесь эритроцитов барана

8. Рабочая доза гемолитической сыворотки с титром 1:1200 для РСК равна:

а) 1 : 3600

б) 1 : 400

в) 1 : 200

г) 1 : 100

д) 1 : 50

9. Альтернативный путь активации комплемента осуществляется:

а) при участии антител

б) при участии ЛПС

в) без образования мембраноатакующего комплекса

г) при образовании комплекса антиген – антитело

д) при образовании R-форм микроорганизмов

10 .Если контроли РСК в норме, то гемолиз наблюдается в контролях (верно все, к р о м е):

а) антигена

б) сыворотки обследуемого

в) гемолитической системы

г) иммунной сыворотки

д) комплемента

11. Компоненты мембраноатакующего комплекса:

а) С1С4С2С3

б) С1С2С3С4С5

в) С5С6С7С8С9

г) С3С5С6С7С8

д) С6С7С8С9

12. РСК используется при диагностике (верно все, к р о м е):

а) сифилиса

б) гонореи

в) риккетсиозов

г) вирусных инфекций

д) дисбактериозов

13. Реакция бактериолиза:

а) не специфична

б) заканчивается фагоцитозом бактерий

в) заканчивается лизисом бактерий

г) заканчивается гемолизом бактерий

д) возможна только in vitro

14. В случае однократно взятой сыворотки критерий оценки РСК при серодиагностике бактериальных инфекций:

а) норма контролей

б) полное отсутствие гемолиза

в) частичный гемолиз

г) диагностический титр

д) нарастание титра антител в 2 и более раз

15. При исследовании парных сывороток критерий оценки РСК при серодиагностике бактериальных инфекций:

а) норма контролей

б) полное отсутствие гемолиза

в) частичный гемолиз

г) диагностический титр

д) нарастание титра антител в 2 и более раз

16. Парные сыворотки:

а) сыворотки однояйцовых близнецов

б) сыворотки разнояйцовых близнецов

в) сыворотки, взятые из разных вен

г) сыворотки двух обследуемых при диагностике одного заболевания

д) сыворотки одного обследуемого, взятые в динамике заболевания

17. Метки, использующиеся в серологических реакциях (верно все, к р о м е):

а) щелочная фосфатаза

б) анилиновый краситель

в) флюорохромный краситель (изоционат флюоресцеина)

г) изотоп

д) пероксидаза

18. Фермент является меткой в серологической реакции:

а) РА

б) РП


в) РСК

г) ИФА


д) РИФ

19. Преимущества ИФА (верно все, к р о м е):

а) возможность автоматизации

б) специфичность

в) визуальный учет

г) чувствительность

д) используется при инфекциях различной этиологии

20. Компоненты ИФА для определения НВs –Ag с целью диагностики гепатита В (верно все, к р о м е):

а) тест-система, содержащая анти-НВs

б) сыворотка обследуемого

в) античеловеческая сыворотка, меченныая пероксидазой

г) анти-НВs, меченные пероксидазой

д) субстрат (ОФД)

21. Критерий учета ИФА при определении НВs –Ag с целью диагностики гепатита В:

а) образование комплекса антиген-антитело

б) образование хромогенного продукта

в) выявление светящихся микроорганизмов, характерных по морфологии для предполагаемого возбудителя

г) ИФА “-” с сывороткой, не содержащей НВs –Ag

д) ИФА “+” с сывороткой, содержащей НВs –Ag

22. Критерий достоверности ИФА при определении НВs –Ag с целью диагностики гепатита В:

а) образование комплекса антиген-антитело

б) образование хромогенного продукта

в) выявление светящихся микроорганизмов, характерных по морфологии для предполагаемого возбудителя

г) ИФА “-” с сывороткой, не содержащей НВs –Ag и ИФА “+” с сывороткой, содержащей НВs –Ag

д) все вышеперечисленное

23. Компоненты ИФА для серодиагностики ВИЧ-инфекции (верно все, к р о м е):

а) античеловеческая сыворотка, меченная пероксидазой

б) античеловеческая сыворотка, меченная флюорохромом

в) сыворотка обследуемого

г) тест-система, содержащая антиген ВИЧ

д) субстрат (ОФД)

24. Критерий учета ИФА при серодиагностике ВИЧ-инфекции:

а) наличие специфических антител

б) образование комплекса антиген-антитело

в) образование хромогенного продукта

г) ИФА “+” с сывороткой, содержащей анти-ВИЧ

д) ИФА “-” с сывороткой, не содержащей анти-ВИЧ

25. Для постановки реакции связывания комплемента необходимо все нижеследующее, кроме:



  1. Эритроцитов барана

  2. Гемолитической сыворотки

  3. Сыворотки больного

  4. Антитоксической сыворотки

  5. Комплемента

27. Что не относится к реакции иммунного лизиса:

  1. Способность специфических антител образовывать иммунные комплексы с клетками

  2. Активация системы комплемента по классическому пути

  3. Лизис клеток

  4. Чаще применяется реакция гемолиза

  5. Осаждение антигена под воздействием специфических антител

28. Реакция нейтрализации основана на способности:

  1. Вызывать лизис эритроцитов

  2. Растворять корпускулярный антиген под влиянием специфических антител

  3. Антитоксической сыворотки нейтрализовать летальное действие токсина

  4. Изменять проницаемость клеточных мембран

  5. Соединения комплекса АГ+АТ с комплементом

29. Для реакции иммобилизации нехарактерно:

  1. Способность антисыворотки вызывать иммобилизацию подвижных микробов

  2. Связана с реакцией между микробными антигенами и антителами

  3. Происходит при холере, сифилисе

  4. Образование мути, а затем рыхлого осадка

  5. Происходит только в присутствии комплемента

30. Для радиоиммунологического анализа характерно все нижеперечисленное, кроме:

  1. Высокая специфичность

  2. Простота исполнения

  3. Высокая чувствительность

  4. Меченный и не меченный антигены конкурируют за ограниченное число участков связывания на антителах

  5. Результат учитывают по гемагглютинации

31. Что из перечисленного не относится к преимуществам ИФА по сравнению с РИА:

  1. Стабильность коньюгатов

  2. Использование радиоактивных изотопов

  3. Результаты можно оценивать без применения аппаратуры

  4. Легко поддается автоматизации

  5. Не используются радиоактивные изотопы

ТЕЗАУРУС (глоссарий):

Лизис


Комплимент

Анатоксин

Изотоп
Примерный хронометраж занятия:




п/п

Этап занятия

Содержание этапа занятия

Методы обучения

(по выбору преподавателя)

Методы контроля

(по выбору преподавателя)

Отведенное время, на этап / мин

1

Вводный

Приветствие, перекличка, оглашение темы, цели и задач, оглашение осваиваемых компетенций, мотивационная характеристика

-

-

10 мин.

2

Контроль

исходного

уровня

знаний


Определение исходного уровня знаний по данной теме

-

Тестирование

Устный опрос



40 мин.

3

Бодрячок

-

Интерактивный

-

5 мин.

4

Перерыв

-

-

-

5 мин.

5

Основной этап

Постановка ИФА.

Оценка полученных результатов.

Постановка РИФ, РИА, РИТ,ПЦР (посещение НОЛ).


Пассивный

(объяснение, демонстрация, наблюдение).



Активный

(Выполнение и обсуждение практических работ, оформление протоколов, рабочих тетрадей, работа с мультимедийными базами данных, компьютерными моделями и программами.)


Интерактивный

(решение ситуационных задач, кроссвордов, работа в группах, блиц-опрос, деловые и ролевые игры, мозговой штурм, критическое мышление, мини-исследования и т.п.)



Проверка рабочей тетради

25 мин.

6.

Этап проверки


Заключительный контроль знаний.

Обратная связь.



Пассивный

Интерактивный




Тестирование

10 мин.

7.

Подведение итогов занятия.

Обсуждение достижения целей и решения поставленных задач, освоенных компетенций.

Оглашение оценок и выставление их в журнал


Заполнение оценочных листов

Пассивный


-

10 мин

8.

Комментарии к домашнему заданию по теме следующего занятия

-

Пассивный


-

5 мин



Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   21   22   23   24   25   26   27   28   ...   63




©dereksiz.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет