Гидроксид натрия (NaOH): Примерно 200 мл 0.1 M NaOH (плотность около 1,06 г/мл) для денатурации.
Аммонийсульфат ((NH4)2SO4): Примерно 100 г для осаждения.
Для удаления остаточных аммонийсульфата ((NH4)2SO4) после его использования в процессе получения коллагена, выполните следующие шаги:
Отцедите смесь: После того как аммонийсульфат выполнил свою функцию и осадил коллаген, остаточный аммонийсульфат останется в растворе вместе с коллагеном в виде осадка. Отцедите смесь, чтобы удалить жидкую фазу.
Промывка водой: Нежно промойте осадок коллагена с использованием дистиллированной воды. Для этого добавьте воду к осадку и перемешайте мягко, чтобы удалить остаточный аммонийсульфат. Затем отцедите воду.
Повторите промывку: Повторите процедуру промывки несколько раз, чтобы убедиться, что остаточный аммонийсульфат полностью удален. Каждый раз используйте свежую дистиллированную воду.
Сушка: После тщательной промывки осадок коллагена можно высушить. Используйте низкую температуру и вакуумную сушку, чтобы избежать повреждения коллагена
Ферменты
Папаин:
Обычно, папаин продаются в виде порошка или кристаллов.
Для начала можно растворить примерно 1 г папаина в приблизительно 100 мл дистиллированной воды или соответствующем буфере.
Конечная концентрация папаина может быть настроена в зависимости от вашего опыта, но обычно начинают с более низких концентраций, а затем увеличивают по мере необходимости.
Бромелаин:
Бромелаин также может быть приобретен в виде порошка или кристаллов.
Примерно 1 г бромелаина может быть растворено в приблизительно 100 мл дистиллированной воды или соответствующем буфере.
Концентрация бромелаина также может быть настроена в зависимости от требований вашего эксперимента.
Папаин:
Папаин обычно продаётся в виде порошка или кристаллов.
Для 100 г куринных лапок, может потребоваться примерно 1-2 грамма папаина.
Растворите указанное количество папаина в соответствующем буфере (например, фосфатный буфер pH 6.0) в объеме около 50 мл
Бромелаин:
Бромелаин также может быть приобретен в виде порошка или кристаллов.
Для 100 г куринных лапок, может потребоваться примерно 1-2 грамма бромелаина.
Растворите указанное количество бромелаина в соответствующем буфере (например, фосфатный буфер pH 6.0) в объеме около 50 мл.
Ферменты:
Папаин: на 500 грамм требуется 20 гр
Бромелаин: на 500 гр требуется 20 гр
Химические реагенты:
1.Аммонийсульфат ((NH4)2SO4): требуется 600 гр
2. Соляная кислота (HCl): 350 гр
3. Гидроксид натрия (NaOH): 280 гр
4. Фосфатный буфер для его приготовления потребуется динатриевая соль фосфата- 75-80 гр, мононатриевая соль фосфата 45-50 гр
Достарыңызбен бөлісу: |