Для исследования цитотоксического действия нового антибиотика на кожный эпителий поставлено две серии экспериментов (А и Б).
А. В опытах in vivo на линейных лабораторных крысах провели 6-часовую аппликацию раствора антибиотика на кожу животных (концентрация препарата многократно превышала лечебную дозу!). Эффект препарата оценивали путем прижизненной микроскопии кожи через 8 ч после прекращения аппликации. В дальнейшем микроскопию проводили дважды с интервалом 8 ч.
Б. В опытах in vitro культуру эпителиальных клеток инкубировали в среде, содержащей исследуемый препарат. Концентрация его соответствовала таковой в опытах in vivo. Через 6 ч культуру клеток отмыли и инкубацию продолжали в среде без препарата. Действие препарата оценивали методами световой и электронной микроскопии в те же сроки, что и в опытах in vivo.
Результаты экспериментов
А. In vivo: через 8 ч после аппликации препарата выявлены признаки дистрофии и мелкоочагового некроза эпителия кожи. В дальнейшем обнаружено нарастание этих изменений.
Б. In vitro: не обнаружено каких-либо признаков повреждения клеток эпителия кожи на всех сроках исследования. Лишь в течение 1-го часа отмечали агрегацию клеток, которая уже не регистрировалась при последующих наблюдениях.
Вопросы
1. Каковы причины различия в результатах опытов in vivo и in vitro? Обоснуйте Ваш ответ.
2. Можно ли утверждать, что повреждение клеток эпителия в опытах in vivo было прямым или опосредованным? Приведите доказательства в пользу Вашего утверждения.
3. Каковы возможные механизмы повреждающего действия препарата на клетки? Какой (или какие) из названных Вами механизмов, учитывая результаты экспериментов in vitro, представляется наиболее вероятным (вероятными)?
4. Какие процессы или функции клеток следует изучить дополнительно in vivo для подтверждения Вашего предположения о механизмах патогенного действия исследуемого препарата?
Достарыңызбен бөлісу: |