Распределение больных демодекозом собак по типам шерсти

Рисунок 2.

Учитывая мнение С. В. Ларионова (1994), а также проведенные им гистологические исследования кожи, это можно объяснить лучшим развитием у них сальных желез. Волосяные луковицы короткошерстных собак более благоприятны для жизнедеятельности клещей (5).

В результате изучения восприимчивости животных к демодекозу в зависимости от возраста мы подтвердили, что заболевание у собак регистрируется уже в 3-х недельном возрасте (14).

Наибольшее количество больных животных было зарегистрировано в возрасте от 7 месяцев до 12 месяцев (36,3%). В возрасте 13-18 месяцев процент зараженных составил 22,3%. У животных 2-3-летнего возраста - 19,8%, старше 5 лет - 13,1% и у собак старше 8 лет - 8,5% (рисунок 3).

Рисунок 3. Распределение демодекоза в зависимости от возраста

При обследовании животных было установлено, что демодекозом поражаются собаки более 30 пород.

Наиболее часто заболевание регистрировали у восточно-европейских овчарок - 14,8%, немецких овчарок - 15,1%, ротвейлеров - 14,4%, французских бульдогов - 13,5%, такс - 9,5%, английских кокер-спаниелей - 7,4%, боксеров - 6,1%, беспородных и примесей - 10,5%.

Менее подвержены заражению были доги (0,7%), американские кокер–спаниели - 4,6%, доберманы - 3,0%, стафордширские терьеры - 5,1%, английские бульдоги - 1,3%, колли - 2,3% (таблица 4) .

Таблица 4

Распределение больных демодекозом собак по породам

Таблица 5

Рисунок 4. Распределение демодекоза по сезонам года

Усиление зараженности в весенний и осенний периоды, может быть связано с сезонной линькой, снижением уровня резистентности организма животных, а также благоприятными в это время года условиями для развития клещей.

К факторам, способствующим распространению заболевания мы отнесли следующие: резкое увеличение поголовья собак в городе и местах их выгула, отсутствие проведения ветеринарно-санитарных мероприятий на территориях скопления животных, неудовлетворительное кормление, плохое содержание и бесконтрольное лечение.

До проведения первых исследований на животных безопасность препарата на этапе клинических испытаний оценивается по результатам изучения токсичности при однократном и длительном применении препарата экспериментальным животным. Чем полнее и тщательнее будут проведены токсикологические исследования на лабораторных животных, тем меньше риск развития нежелательных эффектов у собак.

Оценка токсичности препаратов строится таким образом, чтобы выявить органы или системы, наиболее чувствительные к данному препарату, установить дозовую зависимость выявленных эффектов и степень их обратимости, определить соотношение пользы, ожидаемой от применения препарата на практике, и риска возможных нежелательных реакций. При положительном соотношении этих показателей необходимо сформулировать противопоказания и предостережения к применению данного фармакологического средства в качестве лекарства и наметить мероприятия по устранению возможных нежелательных реакций.

Все экзогенные вещества, поступающие в организм, в том числе лекарственные препараты, обычно включаются в метаболические процессы обезвреживания, которые обеспечиваются механизмами адаптации. Вещество оказывает токсическое действие в том случае, если его количество, поступающее в организм, не может быть обезврежено. Следовательно, наиболее чувствительные органы или системы организма могут быть выявлены как при однократном (острая токсичность), так и при многократном применении препарата (подострая или хроническая токсичность).

Таким образом, для оценки безопасности препарата очень важным и необходимым является изучение острой и хронической токсичности.

По результатам острого опыта определены параметры смертельного эффекта (ЛД₁₆, ЛД₅₀ и ЛД₈₄) и среднее время гибели животных (ЕТ₅₀), которое является быстрым и довольно объективным тестом оценки способности препарата кумулировать в организме.

Животных перед экспериментом предварительно выдерживали в течение 15-ти суток на карантине и 5-ти часов на голодной диете. Под опытом находилось 36 белых беспородных мышах. Контрольным животным вводили воду.

Препарат вводили мышам в следующих дозах:

- 1-й группе животных в дозе – 0,1 мл (5,0 мл/кг);

- 2-ой группе животных в дозе – 0,2 мл (10,0 мл/кг);

- 3-ей группе животных в дозе – 0,3 мл (15,0 мл/кг);

- 4-ой группе животных в дозе – 0,4 мл (20,0 мл/кг);

- 5-ой группе животных в дозе – 0,5 мл (25,0 мл/кг);

- 6-ой группе животных в дозе – 0,6 мл (30,0 мл/кг).

Рисунок 5. Определение токсикологических свойств препарата Амит форте

Таблица 6

Рабочая таблица результатов опыта по острой токсичности препарата Амит форте

Дозы мл/мышь	Наблюдав- шийся эффект	% эффекта (наблюд.)	% эффекта («ожидаем».)	Разность между наблюд. и «ожидаем» % эффекта	Слагаемые для Х2
1	2	3	4	5	6
0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6	0/6 1/6 2/6 3/6 5/6 6/6	0 16,7 33,3 50 83,3 100	0,3 20,0 36,0 52,0 69,2 84,6	0,3 3,3 2,7 2,0 14,1 15,4	0,05 0,12 0,01 0,06 0,22 0,17

ЛД₀ препарата при введении в желудок белым мышам составила 5,0 мл/кг по лекарственной форме; ЛД₁₆ составила 11,0 мл/кг; ЛД₅₀ - 20,0 мл/кг; ЛД₈₄ - 26,0 мл/кг; ЛД₁₀₀ – 30,0 мл/кг.

Вычисление доверительных границ ЛД₅₀.

20 : 1,5 = 13,3 мл/кг (нижняя доверительная граница).

20 х 1,5 = 30,0 мл/кг (верхняя доверительная граница).

Таблица 7

Клинику острого отравления отмечали у животных, получавших смертельные дозы препарата, характеризовалась она угнетением, вялостью животных, наблюдалось нарушение координации движения, учащенное дыхание, у некоторых носовое истечение. Затем наступало боковое положение и гибель от остановки дыхания.

При патологоанатомическом вскрытии этих у животных установили умеренную гиперемию слизистой желудка и незначительное полнокровие печени и почек. При действии препарата в меньших дозах макроанатомических изменений печени, почек, сердца и головного мозга нами выявлено не было.

Таким образом, среднесмертельная доза препарата для белых мышей при алиментарном введении составляет 20 мл/кг, что позволяет отнести этот препарат к 4-му классу опасности (ГОСТ 12.01.007-76).

Одним из важнейших этапов токсикологической оценки является выявления кумулятивных свойств препарата, так как процессы кумуляции в организме составляют одну из основ потенциальной опасности хронического отравления.

Первоначальная доза препарата составила 1/10 от ЛД₅₀, установленной в остром опыте – 20,0 мл/кг массы животного, или 0,04 мл/мышь.

При введении препарата в суммарной дозе, у мышей появились клинические признаки отравления, характеризующиеся кратковременным возбуждением, которое постепенно сменялось угнетением и атаксией. У животных наблюдали мышечную дрожь, затем они сбились в круг, отказывались от корма, дыхание затруднялось и становилось поверхностным и редким. Постепенно мыши впадали в коматозное состояние.

Смерть животных отмечали с 9-х суток при введении препарата в суммарной дозе 18 мл/кг (таблица 8).

Таблица 8

Суммарная доза (ЛД₅₀ многократная), вызвавшая 50% гибель мышей составила 60,80 мл/кг. ЛД₅₀ при однократном введении составила 20 мл/кг. Разделив ЛД₅₀ при многократном введении и ЛД₅₀ при однократном. Коэффициент кумуляции составил 3,04.

По классификации веществ по кумулятивным свойствам препарат относится к группе веществ со слабо выраженной кумуляцией.
3.2.3. Изучение кожно-резорбтивного и местно-раздражающего

действия препарата Амит форте
3.2.3.1. Местно-раздражающее и кожно-резорбтивное действие препарата в опытах на мышах

В течение всего опытного периода внешних признаков токсикоза и гибели мышей нами отмечено не было. Подопытные животные по своему поведению и внешнем виду не отличались от контрольных.

Проведенные нами опыты показали, что однократное и десятикратное нанесение препарата на кожу крысам, в дозах 0,5 и 5 мл/кг массы животного не приводит к гибели. Воздействие препарата при однократном нанесении на кожу сопровождалось признаками раздражения, при повторных аппликациях препарата в дозе 5 мл/кг у крыс отмечалась реакция кожи в виде гиперемии. Эритемы, инфильтрации, изъязвление и других кожных признаков аллергии установлено не было (таблица 9).

Таблица 9

Характеристика местно-раздражающего действия препарата

Амит форте на кожу крыс